一文解读pDC与SLE

在外周血中的DC有三种：浆细胞样 DC （pDC） 和髓系 DC （mDC） 或常规 DC （cDC），后者根据表面标志物 CD1c（BDCA-1）和CD141（BDCA-3） 的表达又可以进一步细分为两个亚群，如下图。

血中分离D

其中pDC产生大量的I型IFN、IFN-α和IFN-β。IFN对包括T细胞，NK细胞和mDC在内的几种免疫细胞具有多效性作用，这使得pDC成为病毒感染的关键反应者。然而，pDC的抗原摄取能力低于mDC，并且在稳态下，pDC可以诱导耐受性而不是免疫反应。

外周血DC的细胞培养

SLE与pDC的相关性

SLE是一种累及机体多个系统的自身免疫疾病，具体病因学不清楚，遗传，免疫，内分泌及环境等多种因素参与疾病进程（皮肤型红斑狼疮相对局限，脏器损伤相对轻微）。美国患病率72.1-74.4/10万，中国患病率居世界第二（70/10万），约有患者100万，女性发病风险是男性的10倍。由于SLE对器官造成的损伤往往是不可逆的，疾病的早期诊治十分重要，但我国由于风湿免疫专科相对缺乏，患者临床表现异质性大，早期患者常因症状就诊而散落于不同科室，早期诊断困难。另一方面，SLE治疗药物有限，常规用药为糖皮质激素，治疗不规范或患者依从性不好常导致疾病反复，系统损伤呈进行性加重。

50-75%的成人及高达90%的儿童SLE患者I-IFN调节基因呈上调，SLE患者循环系统pDC数量是降低的，炎性组织如皮肤/肾脏中pDC常被激活。ILT-7是pDC的表面Marker，而pDC则是产生IFNα最主要的细胞。pDC/IFN导致SLE发病的潜在机制如下：包含自体核酸的免疫复合物、中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）等刺激pDC产生I-IFN，IFN一方面作用于多种免疫细胞，如T、B、Th17等，促进自身抗体的产生；另一方面，IFN与受体结合通过激活下游信号通路参与炎性反应。

图1. pDC/IFN导致SLE发生的潜在机制

靶向pDC的相关药物研发现在也如火如荼，比如Viela Bio公司在美国风湿病学会上公布了VIB7734（ILT-7 mAb）在皮肤型红斑狼疮（CLE）的Ib期疗效数据。本项研究（VIB7734.P1b.S1）共招募31例患者分为4组，患者在标准治疗基础上分别接受5/50/150mg,SC,Q4W，研究结果显示，150mg组在降低IFN/pDC数/CLASI-A改善方面具有显著优势，无不良事件增加（73% vs. 67%）。同样还有渤健，其在研的BIIB059为靶向血液树突状细胞抗原2(BDCA2)的全人源化IgG1单抗。在PhaseII-LILAC试验中，招募具有皮肤表现的活动性SLE，患者接受BIIB059（450mg,SC,Q4W）治疗，24周时疾病活跃关节总数的绝对改变量较安慰剂组降低3.4，达到主要终点。

儒百生物pDC相关服务

【提供pDC含量高的PBMC批次】

pDC由于在PBMC中的含量稀少（常规占比为0.1%~0.4%），因而一般采用阳选的方式进行提取，如采用美天旎的130-097-415kit或130-097-240kit，但如果盲选PBMC进行分选，最终可能导致得到的pDC含量差异巨大，从而造成实验成本的急剧上升和实验所需细胞数量的不足。针对这个情况，我司免费进行了PBMC的pDC含量预筛选服务（Lin-CD123+CD303+），前期我们选择了30个批次进行了验证，数据如下，中位数仅为0.34%，含量最高的批次为0.89%。若需要提取此细胞，我司可提供含量高的批次

【SLE患者PBMC细胞】

由于自免疫疾病具有遗传倾向，但多非单一基因作用的结果，不少与HLA抗原尤其是与DR基因位点相关。

同时在自免疫患者血液中存在高滴度自身抗体和(或)能与自身免疫组织成分起反应的致敏淋巴细胞。如重症肌无力、慢性活动性肝炎、系统性红斑狼疮等常常可见其CD3+细胞比例相较于正常人来说偏高；CD4/CD8+比值也往往失衡，比如在类风湿性关节炎患者中，由于其细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，因而其CD4/CD8常常大于2.5。

因而在药物早期研发过程中若能够通过在相应患者来源的PBMC上面进行assay的验证，肯定是事半功倍。