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CAR-T的原材料,IO药物研发的利器——简要介绍白细胞单采术(Leukopak)


近几年随着肿瘤免疫抗体药物和过继性T细胞治疗的蓬勃发展,作为最基础的实验原材料——免疫细胞收到了越来越多人的关注。


关于PBMC的文章我们这边其实介绍过很多,其中有一篇比较详尽的推文系统的介绍了PBMC的方方面面(一文解读PBMC:药物研发的最佳搭档),也有一些推文比较简略的介绍了组成PBMC的一些亚型细胞的情况,比如T细胞,DC细胞,NK细胞等,感兴趣的朋友可以查看我司公众号历史记录。


但在推广的过程中,我们常常会被问到几个问题:

1.你们来自一个人的PBMC为什么可以达到这么大的量?

2.抽取这么多细胞不会对人产生严重副作用吗?

3.已经采集这么大量PBMC的捐献者为什么隔了一两个月就还能再抽?


很多scientist有这方面的顾虑其实比较正常,因为早期大家都是使用全血来分离PBMC,按照一般的经验来看,最多采集400cc的全血,那可以拿到的PBMC一般也就是600million左右,而且这样的捐献者必须得间隔很长时间(比如6个月)才能再次采集。


因而在大家使用过程中就会遇到一个比较大的问题——实验的稳定性,由于每个人的免疫系统差异比较大,哪怕是同一个人在不同时间采集的PBMC都存在差异,何论不同人的PBMC。为了有效的解决这个问题,在这里我们就采用了白细胞采集术这种技术。


首先上结论,我们来看两者的对比:前者是后者的14倍;

    

通过单采得到的PBMC比全血密度梯度离心过程多14倍,且捐献者可间隔30天重复捐献,一年最多可捐献12次,这使其成为大规模研究或临床前试验的理想选择。


那何为白细胞采集术呢,下面我们就来简单介绍一下:


1、什么是单采血分离术?


白细胞采集术是属于单采血分离术的一种,单采血分离术简单的说就是将人的血液在抗凝剂ACD-A存在的情况下在体外循环离心,全血由于密度的不同会分层,因而我们可以提取特定成分,而将其余成分回输体内,同时在这个过程中,补入提取成分相同体积的生理盐水,保持人体血液总量不变。这种技术其实发展很多年了,早在1914年就有科学家提出这种设想,希望可以用来治疗包括镰刀状细胞贫血和某些类型的癌症在内的疾病。1971年,MD安德森癌症中心首次使用单采血分离术作为分离外周血干细胞的方法;随后随着干细胞动员和冷冻保存方面的突破,使单采血分离术成为外周血干细胞采集的主要方法。现阶段这种技术最常见的用途包括:

1. 采集血浆:用于制备人白蛋白在内的治疗性药物,国内比较知名的如莱士;

2. 采集血小板:常用于手术中,在血站开展;

3. 动员干细胞:常见于干细胞移植;


2、什么是Leukopak(白细胞采集)?


顾名思义,这个就是采集了人体中的白细胞,机器如下图所示Cobe Spectra。正常成年人白细胞数量为(4.0~10.0)x 109/L,血液总量为4-5L,那我们一次采集最多可以采集多少呢?


这个需要根据捐献者的身高和体重来进行衡量,根据要求,现有采集Leukopak的捐献者年龄需大于18周岁,体重需大于50kg,由于国内普遍没有欧美人胖,因而在美国一般采用3个循环,即15L,国内一般采用1.5-2个循环,即7.5-10L。得到的白细胞总量在7-10*10e9。


    


3、采集这么多,不会对人产生影响吗?


一次采集相当于提取了一个人1/4~1/2的免疫细胞,但由于中间维持了整体血量的稳定,因而在采集过程中对人的影响比较小。同时此采集是由专业人士进行操作,血站由于是这方面的专业机构,因而是最理想的操作环境,可确保捐献者的安全。由于在操作过程中需要补入ACD-A抗凝剂,因而捐献者需要摄入一定量的葡萄糖酸钙进行中和。最后由于人体的免疫细胞本身的生命周期即为7-14天,因而当采集完毕后,捐献者能够很快恢复,这个对人的影响远小于采集400cc的血量。       


4、儒百——专业细胞治疗用细胞原材料解决方


我们提供通过单采机采集的单个核细胞成分,即Leuko Pak。Leuko Pak的主要成分:

1)Mononuclear Cells(PBMNC)

2)Red Blood Cells(RBC)

3)Plasma

4)Platelets


Leuko Pak产品优势:

1)按照美国StemExpress的标准采集、运输

2)提供Donor签署的知情同意书

3)Donor病毒测试为阴性(HIV-1/2、HBV、HCV、梅毒)

4)每个批次的产品均提供COA

5)提供产品冷链运输全程的温控记录

6)提供分离MNC的技术指导

7)可先对Donor进行预筛选

8)Donor基本均可以回召



    

No Worry about the Cell Again.

   

【About Us】--儒百   

1.健康人血液免疫学细胞

(1)PBMC及亚型(CD3,CD4,CD8,CD56,CD14等),serumplasma

(2)Cord Blood CD34+

(3) Leukopak

2.疾病患者血液免疫学产品(MNCSerumPlasma

(1)自免疫疾病(SLE, RA等)

(2)癌症(各类实体瘤及血液瘤—ALL,AML,CLL,CML,MM,HL,HNL

(3)糖尿病(DB1, DB2

3.猴子(食蟹猴,猕猴,恒猴)血清,血浆;

4.PDX模型;

5.阳性对照抗体——Anti-PD1, Anti-PDL1Anti-CD47Anti-TigitAnti-Lag3Anti-Tim3等;

6.阴性对照抗体——Anti-HEL(与人源无交叉污染,Fc段可定制化);

7.重组靶点蛋白——5mg10mg20mg100mg等大批次产品,效期久,大大降低采购成本;   


血液免疫细胞介绍:

一文解读PBMC:药物研发的最佳搭档

一次提取10000000000的PBMC.......把人抽干的节奏???!!!

如何选择新鲜及冷冻PBMC?

How Fresh Are Your PBMC?

抗体依赖细胞毒作用(ADCC)

一文解读DC:最佳的抗原递呈细胞

一文解读T细胞激活机制及CART基于此的演变历程

一文解读T细胞家族

免疫细胞靠什么识别“敌人”:胞外受体介绍

创新工程抗体全景图谱

食蟹猴样本(PBMC,血浆,血清等)的体外应用简介


肿瘤免疫治疗相关介绍:

双抗在肿瘤免疫中的介绍

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