上海儒百生物(Schbio Biotech)
专业血液免疫学产品生产商

通用CAR-T,CAR-T与TCR-T面面观

上一篇我们主要介绍了细胞免疫疗法的发展历程,从LAK, CIK, DC-CIK, TILTCR-T, CAR-T,大家也能够看出来其沿着一条路在奋进——得到足够数量的具有更好肿瘤特异性杀伤的效应细胞,同时我们也介绍了CAR-T的演变,随着基因编辑的更加便利和科学家对肿瘤免疫机理的不断深入,CAR-T的演变可以说是进无止尽。


这一篇我们主要介绍下面的2问题:

1. 通用CAR-T优势及原理?

2. TCR-T是什么,和CAR-T的区别是什么,各自优劣势如何?


1.
通用CAR-T优势及原理及挑战是什么?


通用CAR-T在这里指的是同种异体的CAR-T,其优势其实比较明了,大家也很容易理解,最大的就是off-the-shelf,这可以有效降低患者的用药成本,同时犹如我们现在买药一样可以随买随用,另一个我个人感觉很明显的优点就是一部分癌症病人的免疫细胞功能已经不好,在种子本来就不理想的情况下,在这个上面进行CAR然后扩增,最后出来的CAR-T疗效也必然要大打折扣(这应该也是现在很多CAR-T项目入组需要检测免疫细胞功能的原因吧),通用CAR-T可以很好的克服这个问题,有效扩大受众。


既然是通用CAR-T,当然最重要的肯定GvHD:输入的外来CAR-T细胞对于宿主正常细胞的攻击和宿主自身的免疫系统对于CAR-T细胞的攻击。前者我们可以采用破坏CAR-T细胞TCR基因的方式达到,后者的话可以通过破坏CAR-T细胞MHC-来达到。至于达到的方式主要就是现在常见的一些基因编辑手段,如ZFNTALENCRISPR/Cas9


当然知易行难,通过破坏同种异体T细胞的TCR基因和MHCⅠ类基因,理论上是可以产生不引起GVDH并能广泛用于生产的通用CAR-T细胞。然而在实际应用中,仍存在一些关键性问题,例如微量TCR阳性的CAR-T细胞引起的GVDH反应、基因编辑过程存在的脱靶效应等,除此之外,还有许多问题需要进行进一步探索,例如:

1、需要更多的临床数据,以确定通用CAR-T细胞的有效性和毒性;

2、长期随访检测急性和慢性GVDH、排斥反应等副作用;

3、建立和统一CAR-T细胞疗法的临床、工业和监管标准。


2. TCR-T是什么,和CAR-T的区别是什么,各自优劣势如何?


相比于 A-T,关于TCR-T的设想其实更早,但作为膜蛋白的T细胞受体分子 (TCR),相比于抗体分子,其更难克隆和进行蛋白工程的优化。


最早最容易想到的自然是从肿瘤组织中分离出浸润性淋巴细胞(主要是抗原特异性T淋巴细胞),或从自体T细胞群中分离出特定的识别某种抗原的T细胞寡克隆,在体外扩增后回输给病人。但两者都存在相应的问题,TIL仅能从部分患者的肿瘤组织中分离出淋巴细胞,而且需要较长的制备时间(一般至少8周),而且提取的淋巴细胞不一定有抗肿瘤活性。即便扩增后的TIL能杀伤肿瘤细胞,患者也不一定能等待近两个月的时间来接受该治疗。 后者的话自体肿瘤抗原特异性T细胞数量极少,难以产业化,并且从外周血分离的抗原特异性T淋巴细胞回输给患者的治疗有效率多数在10%左右。前段时间自从Iovance公布了TIL积极的治疗数据后,看到很多文章一股脑鼓吹TIL,起的标题搞的好像TIL马上能够攻克肿瘤似的,其实也挺搞笑。


既然从患者体内提取抗原特异性T细胞这么困难,那我们是否可以直接将野生型TCR基因序列转到病人的T细胞上面。从而使其T细胞具备特异性识别肿瘤抗原和杀伤肿瘤细胞的能力。这就是TCR-T的雏形。但尽管这种方法促进了TCR-T产业化,但是由 于野生型 TCR亲和力低及肿瘤的免疫逃逸机制等因素,导致杀伤肿瘤的效果有限。特别是对于在微环境中具有免疫抑制的实体瘤,野生的TCR亲和力通常很难满足拮抗免疫抑制的要求,因此治疗效果有限。


那既然野生型TCR亲和力低且肿瘤免疫逃逸机制,那我们就优化野生型 TCR亲 和力,并在体外对其特异性和有效性进行全面分析,将优化了的TCR基因转导或转染给患者自体的T细 胞,从而增强患者T细胞的肿瘤细胞杀伤能力。这种方法可以对抗肿瘤的免疫逃逸,提高TCR-T成药性。这个就是现在常见的TCR-T


CAR-TTCR-T对比

(1)CAR-T与 TCR-T的活化通路不同:CAR-T转入的基因是CAR分子,即嵌合抗原受体,是一类T细胞本身从来没有过的人为设计的分子。TCR-T转入的是TCR分子,即T细胞受体,是一个从人体T细胞上分离得到的固有分子。因而CAR-T信号通路因缺乏部分反馈调控机制的控制,导致其具有不可控性,这也是形成大量细胞因子风暴和造成患者死亡的原因之一。但从另一方面来看,CAR-T改造空间大,特异性会更强,一旦起效的话可能疗效会非常理想。正所谓:福兮祸所伏,祸兮福所倚。


(2)CAR-T与 TCR-T选择靶点的机制不同:TCR-T靶向主要组织相容性复合体(MHC)递呈抗原,因此可选择更多更特异的肿瘤抗原。这是因为T细胞受体靶向的抗原决定了TCR-T能识别MHC与胞内各种蛋白降解后形成的短肽片段 并递呈到细胞表面的复合物。由于这种靶向特点,相比于CAR-T主要靶向细胞膜抗原(占细胞抗原总数的7% ~10%),TCR-T却可以靶向全部抗原,包括胞外抗原(15%)、胞膜抗原(10%)和胞内抗原(比如细胞质和核)(75%)。目前发现的肿瘤特异性抗原(TSA)即只在肿瘤细胞表达的抗原几乎全是胞内抗原。因而很多人认为TCR-T在治疗实体瘤方面上的优势远远大于CAR-T。但现在我们也看到越来越多CAR-T的企业开始向实体瘤发起冲锋。


参考文献:

Juanjuan Zhao, Quande Lin. et al.
Universal CARs, universal T cells, and universal CAR T cells.
Journal of
Hematology & Oncology.(2018)11:13

区裕升,郑红俊,钟时,李懿. TAEST16001:TCR亲和力增强型特异性T细胞免疫治疗

.中国生物工程杂志 2019 39 (2): 49-61.


Frozen Leukopak 细胞原料


原代细胞作为基础生物医学研究和临床应用的关键原材料,研发人员为了获得更加准确的数据,对于原代细胞的质量也提出了更高的要求。


虽然对于人类原代细胞来说,Fresh产品是理想的原材料,但Fresh产品只能在提取后的24小时内才可以保持较高的活性和质量。随着时间的推移,产品的质量会严重下降(How Fresh Are Your PBMC?)。因而由于运输等导致的“Fresh”细胞不再“Fresh”会危及实验人员后面的实验,并最终误导数据的准确性,而且这些延误同样会浪费宝贵的时间,更不用说造成试剂和设备的浪费了。为了避免这种情况,StemExpress现推出了Frozen Leukopak®。这些Leukopak®能够为研究人员提供了方便和灵活的时间。与Fresh Leukopak®一样,Frozen Leukopak®也是来自单个供体的白细胞分离产物,是由淋巴细胞和低含量的粒细胞和红细胞组成的浓缩外周血单个核细胞(PBMC)(Figure 1)。

Figure 1. Average cell frequencies gathered from Leukopaks® before cryopreservation.


FDA注册的细胞采集中心,StemExpress把从捐赠者处收集的Fresh Leukopak马上使用程控降温将产品进行冷冻,以维持细胞的最佳状态。StemExpress在实验室分析了相同的Leukopak®的冷冻前后的活性情况。在使用我司的Leukopak解冻protocol进行复苏后,我们可以看到复苏后的细胞平均活性为96.33%,而Fresh Leukopak活性为97.56%(Figure 2)。

Figure 2. Viability comparison of fresh and thawed Leukopaks®. Average viability of fresh Leukopaks taken at the time of collection was 97.56% while the average post-thaw viability taken 7 days after cryopreservation was 96.33%.


StemExpress拥有全美最多的FDA注册的血液免疫学采集(美国东西海岸各2个),为美国、加拿大、日本、欧洲等细胞治疗公司供应高稳定性的Leukopak产品,其在细胞材料方面的专业知识可支持从临床前研究到III期临床试验的活体药物的成功。





若对StemExpress的细胞材料感兴趣,欢迎咨询:info@schbio.com

About Us--儒百:专注血液免疫学细胞产品,让客户做到No Worry about the Cell Again.


疾病患者血液免疫学产品(MNC,Serum, Plasma):

自免疫疾病(SLE, RA等)

癌症(各类实体瘤及血液瘤——ALL, AML, CLL, CML, MM, HL, HNL)

糖尿病(DB1, DB2)


猴子(食蟹猴,猕猴)血清;

原装StemExprss进口冷冻 Leukopak


No Worry about the Cell Again.


血液免疫细胞介绍:

一文解读PBMC:药物研发的最佳搭档

一次提取10000000000的PBMC.......把人抽干的节奏???!!!

如何选择新鲜及冷冻PBMC?

How Fresh Are Your PBMC?

抗体依赖细胞毒作用(ADCC)

一文解读DC:最佳的抗原递呈细胞

一文解读T细胞激活机制及CART基于此的演变历程

一文解读T细胞家族


肿瘤免疫治疗相关介绍:

双抗在肿瘤免疫中的介绍

肿瘤碰上免疫:肿瘤免疫循环

免疫检查点药物副作用(irAEs)机制及特点

肿瘤微环境中的免疫细胞及作用机理

人体自带的免疫系统“紧箍咒”

免疫检查点药物研发--PBMC相关体外实验

常见的免疫系统人源化小鼠模型介绍

IgG 亚型结构、生理活性等汇总整理

单抗,ADC,双抗,纳米抗,CAR-T,TCR-T, TIL......一波一波的热潮

LAK, CIK, DC-CIK, TIL, TCR-T, CAR-T......更新换代、进无止境


其它杂项介绍:

OS、PFS、ORR、CR、PR...... 什么鬼

抗体药物命名规则解析

人HLA(MHC)分型类别及分型方法介绍

抗原介绍--从六个方面完整阐述抗原

国内总体癌症情况统计--Cancer Statistics in China

常见癌症简介及对应国内上市药物汇总

浅谈自免疫疾病

治疗自身免疫病药物研究进展

ALL, AML, CLL, CML......搞混了!!!一文简单解读白血病分类

HL, NHL, MM......一文简单介绍淋巴瘤和骨髓瘤




分享到:
会员登录
登录
留言
回到顶部